Anticorps spécifiques au parasite du lait maternel et protection contre l’amibiase et la cryptosporidiose chez les nourrissons bangladais: une étude de cohorte prospective

Dans cette étude de cohorte prospective, la présence d’immunoglobulines A spécifiques du parasite dans le lait maternel était associée à la protection des nourrissons bangladais contre la cryptosporidiose et l’amibiase. Nos résultats suggèrent que l’immunité passive pourrait être utilisée pour la prévention des infections à Entamoeba histolytica et Cryptosporidium chez les enfants dans les régions endémiques

diarrhée, espèces de Cryptosporidium, Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, lait maternel Les parasites intestinaux constituent une importante charge de morbidité chez les jeunes enfants dans le monde Il est largement reconnu que l’allaitement maternel prévient la mortalité infantile et protège contre les maladies diarrhéiques. source de nutrition, le lait maternel fournit aux nourrissons des facteurs immunitaires non spécifiques, tels que la lactoferrine, ainsi que des IgA sécrétoires spécifiques à l’antigène A IgA Dans les pays en développement, l’allaitement réduit la mortalité par diarrhée de & gt; -fold Nous avons émis l’hypothèse L’immunité passive conférée par l’IgA maternelle spécifique au parasite via l’allaitement pourrait être un moyen de protéger les nourrissons contre les parasites entériques Nous avons utilisé une étude de cohorte prospective pour déterminer si les anticorps spécifiques du lait maternel peuvent protéger les nourrissons de la première année de vie.

Méthodes

Les sujets étudiés faisaient partie d’une étude de cohorte prospective communautaire continue sur les infections entériques chez les nourrissons d’un bidonville de Mirpur, à Dhaka, Bangladesh Les nourrissons étaient enrôlés à la naissance et surveillaient activement à domicile les diarrhées. Les échantillons supplémentaires de selles ont été testés pour Entamoeba histolytica, Cryptosporidium species, et Giardia lamblia en utilisant la réaction en chaîne de la polymérase en temps réel comme précédemment publié L’infection diarrhéique a été définie par identification d’un parasite dans une selle diarrhéique qui n’avait pas été présent dans les selles de surveillance mensuelles précédentes. Des échantillons de lait maternel ont été prélevés chez des mères – semaines après la naissance et testés par ELISA enzymatique pour des IgA entières de Cryptosporidium parvum, le domaine de reconnaissance des hydrates de carbone CRD de la lectine E histolytica Gal / GalNac et de Giardia recombinan Au cours du développement du test ELISA, une étape de titrage a été effectuée pour déterminer la dilution optimale nécessaire pour générer une gamme linéaire de valeurs. Les mères ont ensuite été divisées en les percentiles supérieur et inférieur pour la quantité de chaque IgA spécifique au parasite dans le lait maternel

Analyses statistiques

La comparaison des mesures continues entre les niveaux d’anticorps faible et élevé a été réalisée en utilisant un test t indépendant ou des tests non paramétriques. Le temps de la première infection a été analysé sous forme de données de temps de survie. Les probabilités de survie de l’infection ont été estimées à l’aide des méthodes de Kaplan-Meier et les différences de survie des taux d’anticorps spécifiques du lait maternel ont été évaluées à l’aide d’un test de log-rank http://viagra-danmark.net. modèle des risques proportionnels, en tenant compte des variables confusionnelles potentielles

RÉSULTATS

Entre janvier et janvier, les nourrissons étaient inscrits et suivis pendant la première année de vie Quatre mères étaient incapables de donner des échantillons de lait maternel La plupart des familles participantes avaient une dépense médiane de ménage de & lt; US $ par mois et presque% de mères n’avaient pas d’éducation formelle Tableau supplémentaire Nous avons constaté qu’environ% des enfants étaient exclusivement nourris au sein en l’espace de quelques mois et que, selon l’âge, aucun nourrisson n’était allaité exclusivement au lait maternel. allaitement maternel pendant toute la première année de vie. Figure supplémentaire Il n’y avait pas de différence significative entre la durée de l’allaitement maternel exclusif chez les nourrissons avec et sans E histolytica, les espèces Cryptosporidium et G lamblia par test t P =, et respectivement; Tableau supplémentaire

Infection entérique

Au cours de la première année de vie, une infection par Cryptosporidium, G lamblia et E histolytica est survenue chez%,% et% des nourrissons, respectivement Figure supplémentaire, et% avait une diarrhée due à Cryptosporidium pendant cette période. Ces taux étaient similaires à ceux de un sous-ensemble de ces enfants rapportés dans une étude précédente Les infections répétées avec Giardia étaient courantes% les nourrissons avaient & gt; Infection à Giardia mais étaient rares pour les espèces de Cryptosporidium et E histolytica

IgA de lait maternel et protection contre l’infection

Les nourrissons de mères dans le percentile supérieur du lait maternel anti-CRD IgA dans le lait maternel avaient une probabilité significativement plus élevée de survie sans infection par E histolytica au cours de la première année du test de log-rank, P =; Figure A De même, les enfants dont le lait maternel avait une IgA anti-Cryptosporidium élevée présentaient également une probabilité de survie significativement améliorée sans test de log-rank de l’infection à Cryptosporidium, P =; Figure B En revanche, il n’y avait aucune association entre les niveaux d’IgA de lait maternel anti-Giardia et l’infection diarrhéique ou asymptomatique de Giardia, ou l’occurrence de données d’infections répétées non montrée

Figure Vue largeTéléchargement de la courbe de Kaplan-Meier montrant une probabilité de survie différente de l’infection à Entamoeba histolytica A ou Cryptosporidium B dans l’année de vie chez les nourrissons N = basée sur le niveau d’IgA maternelles spécifiques du lait maternel IgA L’axe des y représente la survie Probablement sans infection, et l’axe des x est le temps de survie en jours, pour les premiers jours de vie A, les nourrissons des mères dans le percentile supérieur pour le lait maternel maternel anti-glucides domaine de la reconnaissance rouge avaient une survie significativement plus élevée sans E Infection histolytica que les nourrissons dont les mères étaient dans le test de log-rank noir,, P = B, les nourrissons de mères dans le percentile supérieur pour le lait maternel anti-Cryptosporidium IgA rouge avaient une survie significativement plus élevée sans infection par rapport aux nourrissons des mères dans le test du log-rank noir du percentile inférieur, P = Figure Voir grandTélécharger un graphiqueCourbe de Kaplan-Meier montrant une probabilité différente de sur Vival indemne d’infection à Entamoeba histolytica A ou Cryptosporidium B dans l’année de vie chez les nourrissons N = basé sur le niveau d’immunoglobuline A du lait maternel spécifique au parasite maternel IgA L’axe des ordonnées représente la probabilité de survie sans infection, et l’abscisse est temps de survie en jours, pour les premiers jours de la vie A, les nourrissons de mères dans le percentile supérieur pour le lait maternel maternel anti-glucidique domaine de la reconnaissance rouge avaient une survie significativement plus élevée sans infection E histolytica que les nourrissons dont les mères étaient dans le bas P-B, percentile noir log-rank, test, P = B, les nourrissons des mères dans le percentile supérieur pour le lait maternel anti-Cryptosporidium IgA rouge avaient une survie significativement plus élevée sans infection par rapport aux nourrissons des mères dans le percentile inférieur percentile noir test, P = Les nourrissons exposés à une IgA anti-CRD élevée présentaient un% de risque de risque d’infection réduit [HR],; % intervalle de confiance [CI], -; P =; Tableau supplémentaire et% de risque réduit de maladie diarrhéique d’E histolytica HR; % CI, -; P = Pour la cryptosporidiose, les nourrissons exposés à des taux élevés d’IgA présentaient un risque réduit d’infection par les espèces de Cryptosporidium HR; % CI, -; P =; Tableau supplémentaire et% de réduction du risque de diarrhée des espèces de Cryptosporidium HR,; % CI, -; P = L’association de l’IgA spécifique du parasite avec la protection est restée significative pour les deux espèces E histolytica et Cryptosporidium en fonction de l’âge maternel, de l’indice de masse corporelle, du score z de la taille du nourrisson et des jours d’allaitement maternel exclusif. HAZ à la naissance était protecteur pour l’amibiase, avec une augmentation non-unitaire de HAZ conférant% réduit le risque d’infection à E histolytica HR; % CI, -; P =, comme vu précédemment L’immunofluorescence réalisée sur des oocystes C parvum a démontré la présence d’IgA ciblant la surface des oocystes dans le lait maternel. Figure De même, des travaux antérieurs avaient démontré que les anticorps dirigés contre le domaine CRD de la lectine Gal / GalNAc surface histolytica trophozoïte

Figure Vue largeDiffuse immunofluorescente d’oocystes de Cryptosporidium parvum avec des immunoglobulines IgA de cryptosporidium A spécifiques du parasite Un IgA de Cryptosporidium traité sans anticorps primaire A ou avec du lait maternel B provenant de mères du percentile inférieur ne s’est pas coloré avec IgA de sérum de chèvre anti-humain CYA conjugué , Des oocystes traités avec du lait maternel anti-Cryptosporidium IgA ont été colorés avec l’anticorps secondaire CY-conjugué, démontrant la présence d’IgA dirigés contre l’oocyste de Cryptosporidium dans le lait maternel. Barre d’échelle = μmFigure Voir grandDivulgationTopulation immunofluorescente d’oocystes de Cryptosporidium parvum avec sein spécifique du parasite Les oocystes de Cryptosporidium IgA de lait traités sans anticorps primaire A ou avec du lait maternel B provenant de mères du percentile inférieur ne se sont pas colorés avec IgA C de sérum anti-humain de chèvre conjugué à CY, les Oocystes traités avec du lait maternel anti-Cryptosporidium IgA l’anticorps secondaire CY-conjugué, démontrant la présence d’IgA dirigés contre Cryptosporidium oocyst dans le lait maternel échelle = μmfinalement, pour évaluer si la concentration d’IgA du lait maternel est restée constante pendant toute la période d’allaitement, nous avons testé E histolytica CRD IgA dans des échantillons de lait maternel en série. les IgA du lait au mois étaient significativement corrélées avec les niveaux au mois et au mois Spearman rho = et, respectivement, P & lt;

DISCUSSION

La conclusion la plus importante de cette étude était que l’IgA du lait maternel spécifique du parasite était associée à la protection des nourrissons contre l’infection par E histolytica et Cryptosporidium. Nos résultats sont en accord avec l’immunité passive transférée via le lait maternel IgA. les enfants de mères ayant des IgA anti-Giardia élevées, compatibles avec les travaux antérieurs Les explications potentielles incluent la capacité de Giardia à varier antigéniquement son enveloppe de surface, ou l’exposition extrêmement élevée à ce parasite dans cette communauté. contribuent également à la protection contre l’infectionL’association d’IgA de lait maternel anti-CRD avec une protection contre E histolytica offre un soutien supplémentaire pour l’utilisation de la lectine E histolytica Gal / GalNAc comme vaccin contre l’amibiase, dans ce contexte comme vaccin administré objectif de stimuler le lait maternel IgA Le domaine CRD contient s tous les épitopes d’anticorps neutralisants de la lectine Gal / GalNAc qui bloquent l’adhérence amibienne et la destruction des cellules hôtes [,,] Historiquement, l’immunité contre les espèces de Cryptosporidium a été considérée comme principalement médiée par les cellules Les études actuelles soutiennent un rôle pour l’immunité humorale , conformément à nos travaux précédents montrant une sensibilité accrue associée à des antigènes spécifiques de classe II d’antigène leucocytaire humain , et des données antérieures de réponses immunitaires humorales contre les espèces de Cryptosporidium Nos résultats diffèrent d’une étude péruvienne de Cryptosporidium IgA, probablement en raison d’épidémiologie différente. Il est intéressant de noter que près de la moitié des nourrissons de notre étude ont été infectés par l’espèce Cryptosporidium en fonction de leur âge, avec une infection rare avant plusieurs mois et avec une prédominance masculine, comme nous l’avons déjà signalé. que seul le lait maternel du premier mois de vie a été testé pour tous les anticorps, ces données étant extrapolées pour La première année entière de vie Cependant, des études ont montré qu’à l’exception du colostrum riche en anticorps, il n’y a pas de diminution significative de l’IgA sécrétoire spécifique de l’antigène au cours des premiers mois En accord avec les taux d’IgA E histolytica. D’autres études sont nécessaires pour valider ces constatations épidémiologiquesNous supposons qu’une fois ingérées par le nourrisson, les IgA dans le lait maternel recouvrent les stades infectieux des espèces Cryptosporidium et E histolytica, et peuvent prévenir l’excystation, l’attachement ou l’invasion des cellules épithéliales de l’hôte. Un certain nombre de cibles antigéniques ont été identifiées sur le stade sporozoïte infectieux des espèces de Cryptosporidium, et il reste à voir si les anticorps de ces épitopes peuvent interférer avec l’infection Le concept de l’immunisation passive pour protéger les nourrissons n’est pas nouveau. avec le vaccin contre la grippe empêche la grippe chez les mères et les nourrissons & lt; Bien que l’immunité contre la grippe soit probablement transférée via l’IgG placentaire, notre étude montre que l’IgA du lait maternel peut être une source non reconnue de protection contre les protozoaires entériques. Nos résultats suggèrent que l’immunité passive peut jouer un rôle important dans la défense contre les espèces de Cryptosporidium et E histolytica durant la première année de vie Nos résultats soulignent le besoin et l’urgence de se concentrer sur le développement de vaccins pour les protozoaires entériques. La vaccination des femmes en âge de procréer et la promotion subséquente de l’allaitement maternel peuvent être un moyen de protéger les nourrissons dans les pays à faible revenu. Cryptosporidium et E histolytica, réduisant ainsi le fardeau mondial des maladies diarrhéiques

Remarques

Remerciements Nous remercions les parents et les enfants de Mirpur pour leur participation à cette étude et les Drs Joel Herbein et David Lyerly de TechLab, Inc, pour la fourniture de réactifs pour le test IgAFinancière spécifique au parasite Ce travail a été soutenu par la subvention des National Institutes of Health numéro R AI à WAP et par le Bill & amp; Fondation Melinda Gates Conflits d’intérêts potentiels W A P reçoit des droits de licence de TechLab, Inc, pour le diagnostic de l’amibiase; ces frais sont intégralement reversés à la Société Américaine de Médecine Tropicale et d’Hygiène Tous les autres auteurs ne signalent aucun conflit potentiel Tous les auteurs ont soumis le Formulaire ICMJE pour la divulgation des Conflits potentiels d’Intérêts Conflits que les éditeurs considèrent comme pertinents pour le contenu du manuscrit. divulgué