Évaluation de l’immunodosage enzymatique de Lyme C pour le diagnostic de la maladie de Lyme chez les enfants et les adolescents

Contexte Le dosage immuno-enzymatique E Lyme commercialisé par C Lyme a été approuvé pour remplacer l’EIA par ultrasons à cellules entières standard en tant que test de premier niveau pour le diagnostic de la maladie de Lyme et a été suggéré comme un diagnostic autonome. Nous avons recueilli des échantillons de sérums mis au rebut chez des enfants et des adolescents âgés de ≤ ans subissant un test conventionnel pour la maladie de Lyme dans un seul laboratoire hospitalier situé dans une zone endémique de la maladie de Lyme. un EIA sur tous les échantillons collectés, suivi d’un immunoblot supplémentaire si le résultat du CIA était positif mais que le résultat de l’EIA sur les sonicocytes était négatif Nous avons défini un cas de maladie de Lyme soit comme une lésion d’érythème migrant diagnostiquée par un clinicien, soit positive résultat sérologique chez un patient présentant des symptômes compatibles avec la maladie de Lyme Nous avons ensuite comparé la performance de C EIA seul et comme test de premier niveau suivi par immunoblot, avec celui de la sérologie standard pour le diagnostic de la maladie de Lyme. Résultats Parmi les échantillons collectés,% provenaient de patients atteints de la maladie de Lyme Le C EIA seul avait une sensibilité similaire à celle de la norme test en% vs% pour les tests standards; P = avec une spécificité légèrement inférieure% vs%; P & lt; L’addition d’un immunoblot supplémentaire a amélioré la spécificité de la CIA à% Conclusions Pour les enfants et les adolescents en cours d’évaluation pour la maladie de Lyme, la CIEA pourrait guider la prise de décision clinique initiale, bien qu’un immunoblot supplémentaire devrait encore être effectué

Maladie de Lyme, diagnostic de la maladie de Lyme, C, pédiatrieLa maladie de Lyme est une spirochète transmise par les tiques qui affecte des centaines de milliers de personnes chaque année aux États-Unis , avec un pic d’incidence dans les groupes d’âge scolaire et adolescent. Le diagnostic sérologique actuel de la maladie de Lyme consiste en un protocole de test standardisé: un immunodosage enzymatique à l’aide d’un sonate WCS à cellules entières suivi d’immunoglobulines IgG supplémentaires et d’immunoglobulines IgM d’immunoglobuline M après un EIA positif ou équivoque. Ainsi, la sérologie standard de la maladie de Lyme a une utilité limitée dans les établissements de soins de courte durée où des décisions de prise en charge clinique en temps réel doivent être prises pour la prise en charge des immunoblots. les patients pédiatriques avec la maladie de Lyme présuméeThe C Lyme EIA mesure la réactivité d’anticorps à un peptide synthétique correspondant à la sixième inv région de VlsE, une protéine de surface hautement conservée de la bactérie causale Borrelia burgdorferi La CIA commerciale actuellement disponible peut être administrée en interne en aussi peu qu’une heure et est approuvée par la Food and Drug Administration en tant que premier niveau test à suivre par un immunoblot complémentaire [, -] Chez les adultes, le CIA seul a démontré une sensibilité supérieure et une spécificité comparable à la sérologie standard [- -] Cependant, sa performance n’a pas été rigoureusement étudiée chez les patients pédiatriques en cours d’évaluation À cette fin, nous avons mené une étude transversale sur les enfants et les adolescents en cours d’évaluation pour la maladie de Lyme. Nos objectifs étaient d’évaluer la performance de la C EIA à la fois en tant que test indépendant et dans le cadre de stratégies d’évaluation à plusieurs pour le diagnostic de la maladie de Lyme chez les patients pédiatriques

Méthodes

Étudier le design

Nous avons réalisé une étude transversale chez des enfants et des adolescents âgés de ≤ ans subissant une évaluation sérologique de la maladie de Lyme entre juin et décembre. Notre étude s’est limitée aux tests commandés dans un seul laboratoire hospitalier situé dans une zone endémique de la maladie de Lyme. provenant de divers milieux cliniques, y compris les unités d’hospitalisation, le service des urgences et les cliniques de soins primaires et de surspécialité Le comité d’examen institutionnel a approuvé le protocole d’étude en renonçant au consentement éclairé

Patients de l’étude

Nous avons prélevé un échantillon de sérum prélevé chez des patients chez qui le clinicien traitant avait ordonné un test de dépistage de la maladie de Lyme standard. Nous avions besoin d’un minimum de μL de sérum disponible. Nous avons inclus plusieurs tests du même patient méningites. en tant que groupe témoin asymptomatique, nous avons également inclus un échantillon de spécimens de sérum mis au rebut provenant de patients subissant un test d’allergie avec un test radio-allergosorbant clinique RAST qui ne présentait pas de symptômes compatibles avec la maladie de Lyme

Collecte de données

Nous avons extrait les données suivantes du dossier médical électronique de l’hôpital: données démographiques des patients, durée des symptômes ≤ vs & gt; jours , résultats de la sérologie standard de la maladie de Lyme et indication clinique pour les tests Lorsque l’historique clinique n’était pas disponible dans le dossier médical, nous avons contacté le fournisseur pour déterminer la durée des symptômes ainsi que l’indication clinique ont été incapables de déterminer l’indication clinique pour les tests, nous avons exclu le spécimen de notre analyse

Tests cliniques de routine

Notre institution envoie des échantillons cliniques à un seul laboratoire commercial Laboratoires nationaux ARUP Selon le protocole clinique, une norme WCS Lyme EIA MarDx; Trinity Biotech avait déjà été effectuée pour chaque échantillon clinique Tous les échantillons ayant des valeurs d’indice de Lyme EIA ≥ positives ou équivoques ont été évalués de manière réflexe en utilisant à la fois les immunoblots Western et IgM MarDx; Les immunoblots de Trinity Biotech ont été classés positifs ou négatifs par le laboratoire de diagnostic, conformément aux recommandations d’interprétation des Centres de contrôle et de prévention des maladies

Essais de recherche

Après la collecte, nous avons étiqueté des spécimens d’étude avec des numéros d’étude et les avons stockés à – ° C. Nous avons réalisé le test C Lyme EIA disponible dans le commerce. Immunetics in the Branda Laboratory Massachusetts General Hospital Le test C fournit un résultat quantitatif que nous avons interprété points fournis par le fabricant: C EIA indice valeur ≥ positif, – équivoque, ou ≤ négatif Nous avons classé les tests positifs et équivoques comme positifs dans notre analyse Pour les échantillons positifs ou équivoques C EIA mais négatifs WCS EIA, nous avons effectué IgG de la maladie de Lyme et Immunoblots IgM MarDx, Trinity Biotech au même laboratoire commercial ARUP National Laboratories, en utilisant des critères d’interprétation normalisés Pour un seul échantillon de sérum avec un volume restant insuffisant pour réaliser l’immunoblot ARUP, nous avons réalisé un immunoblot ViraStripe Lyme Viramed Biotech dans le Steere Laboratory Massachusetts General Hôpital

Mesure des résultats

Nous avons défini un cas de maladie de Lyme comme une lésion EM d’érythème migrant diagnostiquée par un clinicien ou un résultat sérologique positif en présence d’un syndrome clinique associé à la maladie de Lyme Un résultat sérologique positif a été défini comme positif ou équivoque. Résultats EIA WCS suivis d’un immunoblot IgG ou IgM positif Les patients ayant un immunoblot IgM positif seul ont été considérés comme sérologiquement positifs uniquement si la durée des symptômes était ≤ jours [, -] Les syndromes cliniques suivants ont été considérés comme compatibles avec la maladie de Lyme: lésion EM simple et précoce, multiples lésions EM disséminées précocement, névrite crânienne, méningite, cardite et arthrite tardive

Groupes de contrôle

Nous avons défini des groupes témoins: symptômes asymptomatiques symptomatiques et sujets témoins asymptomatiques «symptomatiques» présentant des symptômes cliniques compatibles avec la maladie de Lyme mais ne répondant pas à notre définition de cas de la maladie de Lyme, aucune lésion EM et aucun résultat sérologique négatif. les tests de maladie prescrits par leur clinicien traitant en l’absence d’un syndrome clinique associé à la maladie de Lyme, tel que défini ci-dessus, et ne répondaient donc pas à notre définition de cas de maladie de Lyme, indépendamment des résultats des tests sérologiques. Fièvre ou fatigue Les sujets témoins «asymptomatiques» ont reçu un RAST commandé par leur clinicien traitant afin d’évaluer les allergies environnementales ou alimentaires.

Taille de l’échantillon

Sur la base de l’expérience locale antérieure, nous avons supposé qu’environ% des spécimens prélevés proviendraient de patients atteints de la maladie de Lyme confirmée, dont environ Pour démontrer un% de différence de sensibilité entre le C EIA et le test standard pour le diagnostic de la maladie de Lyme précoce avec un α et une puissance de%, nous avons estimé que des échantillons sériques seraient nécessaires chez les patients sous évaluation de la maladie de Lyme

Analyses statistiques

Nous avons d’abord comparé les caractéristiques cliniques et les indications des tests entre patients capturés et ceux ayant des spécimens éligibles manquants. Nous avons comparé les médianes avec le test de Mann-Whitney et les proportions avec le test Second Deuxièmement, nous avons évalué les performances des stratégies de test suivantes recueillies auprès de patients subissant une évaluation sérologique pour la maladie de Lyme, ainsi que les échantillons de patients témoins asymptomatiques: C EIA seul, C EIA suivi d’immunoblots IgG et IgM supplémentaires, EIA WCS suivi par C EIA supplémentaire, et WCS EIA seul contrôle Figure Enfin, nous avons comparé la performance de ces stratégies de test avec celle des tests sérologiques standard de Lyme en utilisant le test We Nous avons utilisé le programme statistique pour les sciences sociales, version SPSS

Figure Vue largeTélécharger la diapositive Stratégies de test alternatif: immunoanalyse enzymatique C EIA seul algorithme, avec C EIA comme test de premier niveau suivi par immunoblots supplémentaires, algorythme algorithme avec WCS EIA WCS entier à cellules entières suivie de C EIA supplémentaire et WCS EIA seul Abréviations : IgG, immunoglobuline G; IgM, immunoglobuline MFigure View largeTélécharger slideAlternate stratégies de test: immunoessai enzymatique C EIA seul, algorithme avec C EIA comme test de premier niveau suivi par immunoblots supplémentaires, algorythme algorithme avec WCS EIA WCS à cellules entières, suivi de C EIA supplémentaire, et WCS EIA seul Abréviations: IgG, immunoglobuline G; IgM, immunoglobuline M

RÉSULTATS

Pendant la période d’étude, les tests de la maladie de Lyme ont été commandés aux patients ≤ ans Figure Nous avons exclu les tests sans informations cliniques disponibles Des autres tests, nous avons pu collecter des échantillons de sérums jetés% des tests éligibles commandés

Sur les échantillons de l’étude,% provenaient de patients atteints de la maladie de Lyme,% de patients présentant des symptômes compatibles avec la maladie de Lyme et négatifs pour le groupe témoin «symptomatique» de la maladie de Lyme, et% de patients non spécifiques. Nous avons également comparé des enfants et des adolescents avec des spécimens d’étude disponibles avec ceux chez qui aucun spécimen n’a été collecté. Tableau Les patients avec des spécimens capturés étaient légèrement plus jeunes et plus susceptibles d’être La répartition des présentations cliniques ainsi que la proportion de patients atteints de la maladie de Lyme ne différaient pas entre les groupes.

Tableau Caractéristiques des patients pédiatriques avec ou sans échantillons sériques rejetés Obtention de patients caractéristiques, Non% a P Échantillons de valeur obtenus n = Échantillons non obtenus n = Âge, médiane IQR, y – – Sexe masculin Stade précoce Early Early disséminés Symptômes tardifs non spécifiques Maladie de Lyme Caractéristiques Patients , Non% a P Échantillons de valeur obtenus n = Échantillons non obtenus n = Âge, médiane IQR, y – – Sexe masculin Stade Early Early Disséminé tard Symptômes non spécifiques tardifs Maladie de Lyme Abréviation: IQR, interquartile rangea Les données représentent Non% de patients, sauf indication contraire En ce qui concerne les échantillons provenant de patients atteints de la maladie de Lyme,% provenaient de patients atteints de la maladie de Lyme précoce,% de ceux présentant une maladie disséminée précoce et% de ceux atteints de maladie tardive. % de cas de maladie de Lyme basés uniquement sur la SE,% basé sur des résultats positifs de sérologie standard avec un syndrome clinique associé à la maladie de Lyme, et% basé sur les résultats EM et positifs de sérologie Nous rapportons la performance des tests EIE Toutes les stratégies de test présentaient une sensibilité globale similaire. L’EICA suivie par la stratégie immunoblot avait une spécificité globale similaire à celle des tests sérologiques standardisés. Cependant, la stratégie CIEA seule et l’EIE WCS suivies par La stratégie de l’EIA avait une spécificité légèrement inférieure La stratégie WCS EIA seule avait une spécificité nettement inférieure à celle des autres stratégies de test Bien que les valeurs prédictives négatives ne différaient pas entre les stratégies de test, les valeurs prédictives positives étaient nettement inférieures dans les stratégies sans immunoblots supplémentaires

Tableau Caractéristiques du test de sérologie standard par rapport à d’autres stratégies de test chez les patients ayant subi un test de dépistage de la maladie de Lyme dans le cadre de la stratégie de tests de soins cliniques Proportion of Samplesa%; % CI Spécificité de sensibilité PPV NPV Exactitude Test standardisé /; – /; – /; – /; – /; – C EIA seul /; – /; -b /; -b /; – /; -b C EIA avec immunoblot /; – /; – /; – /; – /; – EIE WCS avec C EIA /; – /; -b /; -b /; – /; -b WCS EIA seul /; – /; -b /; -b /; – /; -b Stratégie de test Proportion d’échantillons%; % CI Spécificité de sensibilité PPV NPV Exactitude Test standardisé /; – /; – /; – /; – /; – C EIA seul /; – /; -b /; -b /; – /; -b C EIA avec immunoblot /; – /; – /; – /; – /; – EIE WCS avec C EIA /; – /; -b /; -b /; – /; -b WCS EIA seul /; – /; -b /; -b /; – /; -b Abréviations: CI, intervalle de confiance; EIA, immunodosage enzymatique; NPV, valeur prédictive négative; PPV, valeur prédictive positive; WCS, sonicatea à cellules entières Les proportions représentent: sensibilité, vrais-positifs / total avec maladie; spécificité, vrais-négatifs / total sans maladie; VPP, vrais positifs / résultats positifs totaux; VAN, Vrai / Négatif / Résultats négatifs totauxP & lt; Dans tous les groupes de contrôle, le CIA seul et le WCS EIA seul étaient significativement moins spécifiques que les tests standardisés. Tableau L’ajout d’un immunoblot supplémentaire a augmenté la fréquence des tests. spécificité de la stratégie basée sur C à un niveau similaire à celui des tests standardisés

Spécificité de la table de chaque stratégie de test parmi les groupes de contrôle: Symptômes symptomatiques, non spécifiques, et test asymptomatique Spécificité de la stratégie par groupe de contrôle, Proportion d’échantillonsa%; % CI Contrôles symptomatiques Contrôles avec des symptômes non spécifiques Contrôles asymptomatiques Test standardisé /; – /; – /; – C EIA seul /; -b /; -b /; -b C EIA avec immunoblot /; – /; – /; – EIE WCS avec C EIA /; -b /; – /; – WCS EIA seul /; -b /; -b /; -b Spécificité de la stratégie de test par groupe de contrôle, Proportion de Samplesa%; % CI Contrôles symptomatiques Contrôles avec des symptômes non spécifiques Contrôles asymptomatiques Test standardisé /; – /; – /; – C EIA seul /; -b /; -b /; -b C EIA avec immunoblot /; – /; – /; – EIE WCS avec C EIA /; -b /; – /; – WCS EIA seul /; -b /; -b /; -b Abréviations: CI, intervalle de confiance; EIA, immunodosage enzymatique; WCS, sonicatea à cellules entières Les proportions pour la spécificité représentent les vrais-négatifs / total sans maladiebP & lt; pour comparaison avec test standardtierView Large

DISCUSSION

Si le patient semble bien exposé à la méningite de Lyme, présente un risque faible de «méningite à méningocoque» et a une EIE négative, le clinicien traitant pourrait envisager un congé avec des soins de soutien. Comme toujours, s’il persiste En outre, bien que la valeur prédictive positive de la CIA seule ait été nettement inférieure à celle des stratégies de dépistage qui comprenaient un immunoblot supplémentaire, un résultat positif de l’EICI pourrait également être utilisé pour orienter le diagnostic initial. thérapie Par exemple, un enfant présentant une arthrite monoarticulaire et un résultat positif peuvent être observés sans irrigation arthroscopique ou antibiothérapie parentérale en attendant des immunoblots supplémentaires. Bien que le CIEA puisse être utile pour prendre des décisions initiales en matière de prise en charge, nous déconseillons son utilisation. comme le seul test de diagnostic définitif pour la maladie de Lyme Une étude récente de grands laboratoires commerciaux dans le Unite d États ont constaté que des millions de tests sérologiques pour la maladie de Lyme étaient envoyés chaque année à partir de millions de patients Ainsi, même une petite diminution de la spécificité conduirait à une augmentation inacceptable du nombre de faux positifs pour les patients testés étude mentionnée ci-dessus, le% observé de diminution de la spécificité entre le C EIA et les tests standards aboutirait à & gt; des résultats supplémentaires de tests de la maladie de Lyme faussement positifs annuellement Un surdiagnostic de la maladie de Lyme peut entraîner une administration d’antibiotiques inutile ainsi que d’autres effets indésirables Pour cette raison, nous recommandons d’effectuer un immunoblot supplémentaire chez tous les enfants et adolescents Résultat de l’EIANotre étude a plusieurs limites Tout d’abord, tous les patients testés pour la maladie de Lyme ne disposaient pas d’échantillons sériques. Cependant, les différences entre les patients éligibles capturés et non éligibles étaient cliniquement insignifiantes. Troisièmement, bien que les antécédents d’exposition soient requis pour le diagnostic de la maladie de Lyme, nous n’avons pas été en mesure de déterminer l’exposition potentielle des patients à partir des dossiers médicaux disponibles. , parce que le laboratoire d’étude était situé dans une zone endémique f Quatrièmement, bien que l’interprétation des immunoblots de la maladie de Lyme puisse varier entre les laboratoires de diagnostic , tous sauf qu’ils ont été réalisés dans le même laboratoire. Ensuite, nos patients témoins asymptomatiques étaient évalués cliniquement pour des tests alimentaires ou environnementaux. allergies, et nous ne pouvons pas exclure la possibilité que la fréquence des résultats sérologiques de la maladie de Lyme fausse-positive puisse différer chez ces patients. Plus important encore, notre étude a été limitée par notre comparaison des stratégies de test à un standard diagnostique défectueux. la lésion n’est pas toujours classique et chevauche plusieurs autres diagnostics de maladie non-Lyme , certaines lésions des patients peuvent avoir été diagnostiquées à tort comme une maladie de Lyme précoce. Les tests sérologiques secondaires peuvent être faussement négatifs dans une maladie précoce et disséminée . % des spécimens d’étude classés comme ayant un EIA faussement positif provenaient de patients Maladie de Lyme à diffusion précoce suspectée chez qui les résultats des tests conventionnels étaient négatifs Bien que nous ayons été incapables d’obtenir des échantillons de sérum de convalescence chez ces patients, certains d’entre eux pourraient avoir une maladie de Lyme disséminée précoce et donc un résultat CIA positif. Les résultats sérologiques de la maladie de Lyme peuvent demeurer positifs après une exposition antérieure à Borrelia spp, même après un traitement adéquat, et certains patients classés comme ayant la maladie de Lyme peuvent avoir eu une infection antérieure Cependant, même en tenant compte des limites ci-dessus, notre cas de maladie de Lyme la définition représente la meilleure norme diagnostique disponible et reproduit la pratique clinique actuelle. D’autres études devraient se concentrer sur de nouvelles approches pour améliorer le diagnostic de la maladie de Lyme. En résumé, l’EIA de Lyme C seul a une sensibilité équivalente avec une diminution modeste de la spécificité. le diagnostic de la maladie de Lyme chez les enfants et les adolescents L’approche basée uniquement sur la CIEA entraînerait un traitement excessif si elle était utilisée au niveau national, mais pourrait être utile pour guider la prise en charge initiale d’un enfant ou d’un adolescent présentant des signes ou des symptômes compatibles avec la maladie de Lyme potentielle. diagnostic de la maladie, notre étude soutient l’utilisation de la C EIA comme test de diagnostic de première intention chez les patients pédiatriques en cours d’évaluation pour la maladie de Lyme Dans le scénario clinique approprié, la C EIA pourrait limiter les procédures inutiles et permettre un traitement approprié.

Remarques

Remerciements L’immunité a fourni des réactifs et des logiciels pour l’immunodosage enzymatique C Dysclaimer Immunetics n’a pas contribué à la conception de l’étude, à l’analyse des données ni à la préparation des manuscrits. Soutien financier Ce travail a été subventionné par la Bourse de recherche Boston House Une subvention pilote à LEN et à Harvard Medical School Harvard Catalyst Early Clinical Données accordées aux conflits d’intérêt LE NPotential Rapports JAB recevant une subvention pour d’autres enquêtes de recherche d’Immunetics, bioMérieux, Alere, DiaSorin, la Bay Area Lyme Foundation et les National Institutes of Health ; Il est également consultant rémunéré pour T Biosystems et consultant rémunéré pour AdvanDx. AJM est membre du comité consultatif scientifique de BacterioScan. Tous les autres auteurs ne signalent aucun conflit potentiel Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits potentiels de conflits d’intérêts les éditeurs considèrent pertinents au contenu du manuscrit ont été divulgués