L’impact du tropisme VIH sur la diminution du nombre de cellules CD4, la progression clinique et la réponse subséquente à un premier traitement antirétroviral

Contexte Virus de l’immunodéficience humaine Le VIH utilise 2 récepteurs de chimiokine distincts, CCR5 R5 ou CXCR4 X4, lors de l’entrée. Les virus peuvent être tropicaux R5, tropicaux X4 ou doubles / mixtes. Le tropique R5 tropique prédomine à des taux élevés de CD4, avec le nombre Méthodes Nous avons étudié la relation entre le tropisme et la diminution du nombre de cellules CD4 avant l’initiation du traitement antirétroviral, la fréquence des événements cliniques et les réponses au traitement antirétroviral dans une cohorte de patients naïfs de traitementRésultats Quatre cent deux les patients naïfs de traitement ont subi une détermination de tropisme; 326 hébergeaient le virus à tropisme R5 et 76 hébergeaient le virus à tropisme X4 ou D / M. Après ajustement pour les caractéristiques initiales, le taux de diminution du nombre de cellules CD4 était significativement plus élevé chez les patients infectés par le virus X4 ou D / M 12 mois = 026 Deux cent vingt-neuf individus infectés par le virus R5-tropique et 60 individus infectés par le virus X4 ou D / M-tropique ont commencé un traitement antirétroviral entre le tropisme et le temps de l’analyse des données. Les augmentations du nombre de cellules CD4 étaient similaires Les événements cliniques étaient significativement plus fréquents dans le groupe infecté par le virus X4- ou D / M-tropique. L’analyse multivariée a démontré un risque relatif d’éprouver un risque clinique. événement de 256 intervalle de confiance à 95%, 137-476; P = 003 chez les patients infectés par des virus à tropisme X4 ou D / M. La présence de virus à tropisme D / M ou X4 a un effet délétère sur la diminution du nombre de cellules CD4 et le risque de maladie clinique La réponse au traitement antirétroviral standard n’est pas affectée par tropisme viral

L’entrée du VIH dans les cellules cibles est un processus par étapes qui comprend la fixation à la surface des cellules CD4, l’interaction avec les corécepteurs de la surface cellulaire et la fusion de l’enveloppe virale et des membranes cellulaires hôtes. de 2 récepteurs de chimiokine de surface cellulaire, CCR5 R5 ou CXCR4 X4 Cette liaison corécepteur entraîne des changements conformationnels dans la gp41, ce qui permet la fusion des membranes cellulaires virales et hôtes pour faciliter la fusion et la libération du noyau viral dans le cytoplasme des cellules hôtes. ou X4 individuellement ou peut être un virus double tropique qui peut se lier à R5 et X4 La technologie actuelle de criblage rapide ne fait pas la distinction entre un virus à double tropique et des mélanges de virus utilisant R5 et X4; ainsi, ce virus est appelé virus D / M double / mixte. Bien qu’un certain nombre d’autres récepteurs de chimiokines puissent être utilisés par le VIH in vitro, il n’y a aucune preuve à ce jour que ceux-ci jouent un rôle in vivo dans le virus gp120 viral. la région «boucle V3», très variable et flexible, détermine l’utilisation des corécepteurs [1] Le VIH transmis sexuellement est principalement un tropisme R5; la transmission des souches utilisant X4 semble être limitée [2, 3] La présence du virus X4-tropic est associée de façon constante à un faible nombre de cellules CD4 chez les individus naïfs et ceux qui ont déjà été traités. toutefois, on trouve des populations de virus tropicaux R5 et de tropiques D / M chez toutes les strates de cellules CD4 [4-9]. On croit que l’émergence du virus X4-tropique entraîne une diminution plus rapide du nombre de cellules CD4 et progression accélérée de la maladie [10-13], bien que l’on ne sache pas si cela est en cause. Des modèles animaux ont montré qu’une immunité spécifique réduite au VIH peut entraîner un changement de tropisme [14], soutenant l’hypothèse que l’émergence du virus X4 pourrait être Un certain nombre de tests de phénotypes de corécepteurs recombinants rapides, fiables et à haut débit ont été développés. Ces tests utilisent un virus synthétisé avec des séquences d’enveloppe de VIH dérivées de patients pour infecter des lignées cellulaires conçues pour exprimer CCR5 ou CXCR4. et l’infection des lignées cellulaires est détectée en utilisant un gène rapporteur comme la luciférase dans le test Monogram Biosciences Trofile [15] Les résultats sont signalés comme virus R5, X4, ou D / M Avec le test Trofile, minori les sous-populations à tropisme alterné sont détectées de manière fiable lorsqu’elles sont présentes à 5% -10%; à 10%, la sensibilité du test était de 100%. La charge virale plasmatique au-dessus de laquelle les échantillons peuvent être amplifiés de manière fiable dans le test Trofile est de 1000 copies / mL [15]. Le développement et l’application de ces tests ont contribué à étude des antagonistes des corécepteurs in vitro et dans les essais cliniques et ont également été utilisés pour réévaluer l’épidémiologie de l’utilisation des corécepteurs dans de grandes populations de thérapie antirétrovirale ART naïfs et expérimentés [4-10] Les tests de tropisme pourraient jouer un rôle dans la prédiction de la progression de la maladie chez les patients naïfs de tout traitement et pourrait aider à décider quand commencer le TARV

Méthodes

Le Chelsea and Westminster Hospital London, Royaume-Uni, compte une cohorte active de 6 000 personnes infectées par le VIH. Des examens de routine, y compris des examens hématologiques, biochimiques, immunologiques et virologiques, sont effectués tous les 3-4 mois, ainsi que les résultats de ces investigations. les antécédents thérapeutiques et les événements cliniques sont introduits de manière prospective dans une grande base de données de la clinique. Des échantillons de plasma ont été prélevés et stockés régulièrement depuis 1996; Le comité d’éthique de recherche de Riverside en surveille l’utilisationParmi une cohorte de patients infectés par le VIH qui ont subi un test de tropisme dans le cadre d’une étude épidémiologique transversale [4], nous avons identifié tous les patients naïfs au moment de la détermination du tropisme. étude, les échantillons ont été sélectionnés sur la base de la disponibilité d’un génotype viral Virco de date à date pour fournir une information sur toute association possible avec des mutations du gène pol et du clade viral. Les caractéristiques des échantillons qui ont échoué au phénotype co-récepteur ont été également évaluées pour confirmer que l’ensemble d’échantillons typés était représentatif de la population échantillonnéeCoreceptor le tropisme a été déterminé à l’aide du test Monogram Biosciences Trofile ac Les patients ont été divisés en 2 groupes: les patients infectés par le virus R5-tropique et les patients infectés par le virus à tropisme D / M ou X4. Nous avons utilisé la base de données pour enregistrer les données concernant le nombre de cellules CD4 et la charge virale avant et après avoir commencé l’ART de première intention Aux fins de cette étude, ART a été défini comme étant au moins 2 analogues nucléosidiques en association avec un inhibiteur non nucléosidique de la transcriptase inverse NNRTI ou un inhibiteur de la protéase PI, indépendamment du ritonavir boostant. la définition de la maladie ou de la mort survenant après le début du traitement antirétroviral a été enregistrée Les patients ayant reçu un schéma posologique double ou en monothérapie ou ayant eu un suivi de <6 mois après un test de tropisme ont été exclus de l'analyse; Les données ont été censurées à 96 semaines, à la fin du suivi ou au moment du changement de traitement en raison d'une défaillance virologique. Comme des données longitudinales étaient disponibles pour la numération des CD4, un modèle linéaire MIXED a été utilisé pour calculer la diminution du nombre de cellules CD4 coup de soleil. La procédure MIXED dans SAS SAS Institute a été utilisée en ajustant le nombre de cellules CD4 comme variable dépendante. Les variables indépendantes comprenaient les effets fixes du tropisme et la durée du tropisme regroupés en trois groupes. Intervalles d’intervalle de mois et tropisme par temps Une matrice de covariance non structurée a été utilisée pour modéliser les erreurs internes Les estimations de variation du nombre de cellules CD4 par rapport à la ligne de base ont été obtenues par interaction temporelle Les estimations des tendances dans le temps sont présentées comme des estimations ponctuelles avec IC à 95% D’autres analyses multivariées ont été utilisées pour ajuster d’autres covariables supposées avoir un effet confusionnel ou résiduel potentiel sur tendance du nombre de cellules CD4 au fil du temps; L’analyse χ2 a été utilisée pour tester la différence entre les proportions de patients dans chaque groupe qui ont atteint une charge virale de suppression virale, <50 copies / ml après le début du traitement et le temps nécessaire pour atteindre la charge virale. 50 copies / mL Les analyses de survie ont été ajustées pour la charge virale de référence et l'utilisation de ART Une analyse de régression logistique multivariée et multivariée a été réalisée en utilisant la procédure GENMOD dans SAS SAS Institute, avec lien logit et distribution d'erreur binomiale pour identifier les facteurs associés à la probabilité du tropisme R5 Toutes les analyses statistiques ont été effectuées à l'aide de SAS, version 91 SAS Institute, et toutes les valeurs P présentées sont bilatérales

Résultats

Un total de 402 patients admissibles naïfs de traitement ont subi un test de tropisme; 326 de ces patients hébergeaient le virus à tropisme R5, 73 hébergeaient le virus à tropisme D / M et 3 hébergeaient le virus à tropisme X4. Au moment de l’analyse en août 2006, 340 des 402 personnes avaient commencé le traitement antirétroviral; 51 des 340 patients ont été exclus la durée du suivi était insuffisante pour 28 patients, et 23 ont été prescrits un régime exclu [voir Méthodes], laissant 229 patients infectés par le virus R5-tropique et 60 patients infectés par X4- ou D / M virus -tropicLes caractéristiques de la ligne de base sont décrites dans le tableau 1; La numération cellulaire initiale des CD4 était significativement plus faible et la charge virale était significativement plus élevée chez les patients infectés par le tropisme X4 ou le virus D / M-tropique, par rapport aux patients infectés par le virus. Virus à tropisme R5 Il n’y avait pas de différence entre les deux groupes en termes de nombre de mutations de résistance génotypique de base pour les mutations des inhibiteurs nucléosidiques de la transcriptase inverse, P = 826; pour les mutations de NNRTI, P = 893; pour les mutations PI, P = 550 données non montrées

Tableau 1View largeTélécharger slideBaseline caractéristiques démographiquesTable 1View largeTélécharger slideBaseline caractéristiques démographiquesLes diminutions du nombre de cellules CD4 avant le début du traitement sont montrées dans la figure 1 A 12 mois, la diminution moyenne du nombre de cellules CD4 dans le groupe infecté par le virus X4- ou D / M-tropic était statistiquement significativement plus élevé que dans le groupe infecté par le virus à tropisme R5 P = 026 Par la suite, une diminution du nombre de patients dans le groupe infecté par le virus à tropisme X4 ou D / M a été observée; ainsi, les analyses statistiques étaient susceptibles de donner des résultats incertains

Figure 1View largeDownload slideDecrease dans le nombre de cellules CD4 du temps de référence de tropisme dans le traitement antirétroviral Patients naïfs d’ART Toutes les données sont antérieures au début du traitement antirétroviral et ont été censurées au début de l’ART Les barres d’erreur indiquent 95% IC Diminution de la numération des lymphocytes CD4 par rapport au temps de référence du dosage du tropisme dans le traitement antirétroviral Patients naïfs d’antirétroviraux Toutes les données sont antérieures à l’instauration du traitement antirétroviral et ont été censurées au début de l’ART. IC à 95% Les différences pondérées par le temps des valeurs moyennes par rapport aux valeurs initiales ont été estimées à l’aide d’un modèle MIXED linéaire. Le premier schéma thérapeutique prescrit est présenté dans le tableau 2. Dans l’ensemble, il existe une différence statistiquement significative entre les deux groupes. -, ou stimulé régime basé sur PI, avec plus de patients dans le groupe infecté par le virus R5-tropique commençant un INNTI, et plus de patients dans le groupe infecté par le virus X4 ou D / M-tropique initiant un IP boosté ou non boosté En raison des différences dans le type de régime prescrit, cela a été ajusté dans la réponse à l’analyse ART

Tableau 2View largeDownload slidePourcentage de patients dans le groupe infecté par le virus R5-tropique et dans le groupe infecté par le virus X4- ou dual / mixte D / M-tropique, selon le schéma HAART prescritTable 2View largeDownload slidePourcentage de patients du groupe infecté par R5- La réponse immunologique à la multithérapie est décrite dans la figure 2. Sur 24 mois, l’augmentation du nombre de cellules CD4 dans les 2 groupes n’a pas été significativement différent A 12 mois, l’augmentation du nombre de cellules CD4 était de 185 cellules / mm3 IC 95%, 166-204 cellules / mm3 et 182 cellules / mm3 IC à 95%, 145-219 cellules / mm3 dans les groupes infectés par R5-tropique virus et virus à tropisme X4 ou D / M, respectivement P = 812 À 24 mois, les individus infectés par le virus R5-tropique ont connu une augmentation du nombre de cellules CD4 de 247 cellules / mm3 IC à 95%, 227-267 cellules / mm3, et les patients dans le groupe infecté par le virus X4 ou D / M-tropique avaient une augmentation de la cellule CD4 compte de 292 cellules / mm3 IC à 95%, 254-330 cellules / mm3; P = 482

Figure 2View largeDownload slideImmunologique modification de la numération des lymphocytes CD4 en thérapie antirétrovirale ART chez un patient sans antirétroviraux Les données ont été censurées au début du traitement antirétroviral et ajustées en fonction de la charge virale initiale et de la catégorie ART. Les barres d’erreur indiquent 95% IC ART chez les patients naïfs d’ARV Les données ont été censurées au début du traitement antirétroviral et ont été ajustées en fonction de la charge virale initiale et de la classe d’antirétroviraux. IC à 95% Les différences pondérées en fonction du temps des valeurs moyennes par rapport aux valeurs initiales ont été estimées à l’aide d’un modèle linéaire MIXED. Les taux de suppression virologique dans les 2 groupes étaient comparables; 712%, 734% et 725% des patients infectés par le virus R5-tropique avaient une charge virale & lt; 50 copies / mL à 6, 12 et 24 mois, respectivement. Taux de suppression virologique parmi ceux infectés par X4- ou D / Le virus M-tropique était de 750%, 783% et 683% aux mêmes moments, respectivement à 6 mois, P = 637; à 12 mois, P = 509; À 24 mois, P = 670 Le délai de suppression virale était également similaire dans les 2 groupes de données non montrés. Dans le groupe infecté par le virus R5-tropic, 27 83% des 326 patients ont commencé le TAR pendant la période de suivi de 12 mois. significativement moins que les 25 329% des 76 patients infectés par un virus à tropisme X4 ou D / M ayant initié un traitement au cours de la même période P1 001 La fréquence des événements cliniques était significativement plus élevée dans le groupe infecté par X4- ou D / M -tropic virus après ajustement pour la numération des CD4, la charge virale et le traitement antirétroviral Un total de 23 71% des 326 patients infectés par le virus R5-tropique a présenté un événement clinique, comparé à 17 224% des 76 patients infectés par X4- ou D / M-tropic souches 001, après ajustement du nombre de cellules CD4 et de la charge virale initiales En utilisant une analyse de régression logistique ajustée pour les paramètres immunologiques et virologiques de base, le risque relatif d’un événement clinique survenant chez les patients porteurs du virus R5 abritant X4- ou virus D / M-tropique, était de 046 95% CI, 022-098; P = 044 Les événements cliniques diagnostiqués sont décrits dans le tableau 3

Tableau 3View largeTélécharger les diapositives Événements cliniques diagnostiqués au cours de la période de 12 mois suivant le test de tropismeTable 3View largeTélécharger la diapositive Événements cliniques diagnostiqués pendant la période de 12 mois suivant les tests de tropisme

Discussion

Il est à noter que des différences dans la diminution du nombre de cellules CD4 ont émergé au fil du temps, indiquant que les études évaluant les effets des changements de tropisme sous l’influence des antagonistes des corécepteurs nécessitent un suivi prolongé de plus d’un an. -naive individus sur la diminution du nombre de cellules CD4 diffère de l’observation de D / M- ou X4-tropic virus pendant le traitement antagoniste des corécepteursPlus de patients dans le groupe avec le virus R5-tropic que dans le groupe avec X4- ou D / M-tropic virus traitement de première intention par les INNTI 858% vs 717% Ceci était probablement dû au fait que les personnes infectées par le virus X4 ou D / M-tropique avaient tendance à commencer le traitement plus tôt, comme le montre le nombre de patients recevant un traitement. à 12 mois, et l’utilisation croissante de HAART à base d’INNTI dans le groupe à virus R5-tropic reflète les changements dans les pratiques de prescription au Royaume-Uni au fil du temps. En outre, le fait que les individus hébergeant le les charges virales de seline et les numérations de CD4 plus faibles peuvent avoir entraîné une plus grande utilisation de PI dans ce groupe en raison du biais de sélection des IP pour les patients avec une maladie avancée. Comme il s’agissait d’une étude non randomisée, des différences dans les schémas de prescription entre les groupes étaient prévisibles. mais la majorité des individus ont reçu un INNTI, indépendamment du tropisme, et les grandes analyses de cohorte ont démontré peu de différence entre les régimes basés sur IPN et INNTI boostés. Nous avons observé un taux accru d’événements cliniques au cours des 12 mois après le test de tropisme. ou virus D / M-tropique après ajustement du nombre de cellules CD4 initiales et de la charge virale Comme la majorité des patients infectés par le virus X4 ou D / M-tropic ont commencé un traitement au cours de cette période de 12 mois, ils n’ont pas été censurés. HAART D’autres études ont donné des résultats similaires [10-13] lorsque le tropisme viral a été déterminé par un dosage spécifique [10, 11] ou estimé en analysant la capacité de la Une étude longitudinale portant sur 68 individus de l’étude Multicenter AIDS Cohort Study a démontré que l’émergence du virus X4-tropique était plus fréquente chez les patients ayant présenté une progression de l’infection par le VIH que chez ceux qui n’en souffraient pas [ En outre, plus de la moitié des participants à cette étude qui ont connu une diminution soudaine du nombre de cellules CD4 ont montré un passage au tropisme X4 avant la diminution. Enfin, une analyse de cohorte récemment présentée a également montré que le tropisme X4 était accéléré. La progression de la maladie est ajustée à la charge virale initiale et à la numération des CD4, ce qui est cohérent avec nos résultats [19] Ceci peut être secondaire au fait que l’évolution de l’infection par le VIH est associée à un dysfonctionnement immunitaire. -les virus utilisés peuvent infecter un plus large éventail de cellules cibles, par rapport aux souches de VIH limitées à l’entrée à médiation par CCR5, comme les éosinophiles [20] et les cellules CD8 [21] La susceptibilité des cellules cibles peut expliquer, en partie, différents taux et types d’événements opportunistes. Dans cette étude, nous avons analysé les résultats d’une évaluation du tropisme effectuée en une seule fois; en l’absence de test de tropisme longitudinal, nous ne pouvons exclure la possibilité que certains individus classés comme étant infectés par le tropisme R5 ou le virus D / M tropique aient subi un changement de tropisme au fil du temps. Des différences de 4 à 6 semaines ont été observées chez 8% des patients inclus dans les essais cliniques avec des antagonistes du CCR5 [22, 23]. Dans une étude longitudinale chez des patients infectés par le VIH ayant reçu un TAR stable et présentant des charges virales détectables, dans les deux directions [24] Dans cette étude, 72 patients ont subi une médiane de 3 tests de tropisme sur 9 mois; 12% des patients infectés par le virus à tropisme R5 à l’état initial ont migré vers le virus D / M-tropique pendant un an et 11% avec le virus tropique D / M à l’état basique ont été transférés au virus tropique R5 ou X4 pendant la même période. Ces changements apparents de tropisme peuvent représenter des oscillations de la quantité de virus X4 tropique autour de la limite de détection. La nature bidirectionnelle des changements de tropisme suggère que tout changement dans notre population aurait dû être équilibré. En outre, parce que nos patients étaient naïfs, En résumé, nous avons démontré que la présence du VIH tropicale D / M est associée à une progression immunologique et clinique accélérée. Les individus infectés par le virus X4-tropique seulement ont été analysés dans le groupe infecté par le virus D / M-. virus tropique, mais parce que les nombres étaient très petits 3 patients infectés par le virus X4-tropique seulement dans la cohorte entière, ces résultats ne s’appliquent pas nécessairement au tropisme viral X4 pur tropisme viral, ho wever, n’a pas d’impact sur la réponse du nombre de cellules CD4 à la TARV, le délai de suppression virale, ou les taux de suppression virale sur une période de 2 ans

Remerciements

Soutien financier Le St Stephen’s AIDS Trust est un organisme de bienfaisance enregistré Le traitement des échantillons de la cohorte initiale a été financé par les conflits d’intérêts de PfizerPotential GM a agi comme enquêteur et membre du bureau des conférenciers pour Pfizer et a été consultant auprès de Monogram BG. un consultant pour Pfizer et Monogram Tous les autres auteurs: pas de conflits