Prévalence élevée de la réactivation du virus de la varicelle et du zona chez les patients séronégatifs au virus de l’herpès simplex atteints de paralysie faciale périphérique aiguë

Le virus varicelle-zona VZV et le virus de l’herpès simplex HSV sont considérés comme les principales causes de paralysie faciale périphérique aiguë APFP Cent quarante-deux patients avec APFP ont été analysés par des tests sérologiques et l’analyse de réaction en chaîne par polymérase syndrome de Ramsay Hunt a été diagnostiqué chez les patients. les patients restants diagnostiqués cliniquement avec la paralysie de Bell, la réactivation VZV sans zoster zoster sinus herpète a été détectée chez les patients% La prévalence des anticorps anti-HSV chez les patients atteints de paralysie de Bell était significativement plus élevée que la prévalence chez les patients atteints de VZV. En revanche, une forte incidence de réactivation du VZV chez les patients HSV séronégatifs avec APFP a été observée. Nos données indiquent que le VZV est l’un des principaux agents étiologiques de la paralysie de Bell cliniquement diagnostiquée et que la réactivation du VZV provoque la PFP chez la plupart des patients

De nombreuses causes infectieuses de la paralysie faciale périphérique aiguë APFP ont été identifiés, comme l’otite moyenne, la maladie de Lyme et certaines infections virales. Réactivation du virus varicelle-zona VZV est une cause connue du syndrome de Ramsay Hunt APFP est caractérisé par le zona autour de l’oreille, la paralysie et les symptômes du huitième nerf crânien perte auditive et / ou vertige Dans certains cas de syndrome de Ramsay Hunt, l’éruption du zona apparaît plusieurs jours après le début de la paralysie faciale; paralysie faciale périphérique idiopathique La paralysie de Bell est initialement diagnostiquée chez ces patients. En outre, le VZV cause l’APFP sans lésions cutanées; ces cas ont été dénommés zoster sine herpete ZSH, et le diagnostic est fait par des tests sérologiques et / ou des analyses PCR. Nous avons précédemment montré que l’analyse PCR est utile pour le diagnostic précoce de ZSH et que certains cas de ZSH VZV Le virus de l’herpès simplex HSV est également soupçonné de causer APFP Des études sérologiques ont montré que la prévalence des anticorps anti-HSV chez les patients atteints de paralysie de Bell est plus élevée que chez les témoins sains, ce qui suggère une réactivation du VHS. dans la pathogenèse de la paralysie de Bell Dans ces études précédentes, cependant, les patients avec ZSH n’étaient pas différenciés de ceux avec la paralysie de Bell. En outre, les dosages sérologiques spécifiques du HSV n’étaient pas réalisés chez les patients APFP. de la paralysie de Bell au moyen de l’analyse par PCR et des tests sérologiques, puis comparé la prévalence des anticorps spécifiques du type HSV chez les patients avec VZV réactiv Le syndrome de Ramsay Hunt ou ZSH et la prévalence chez les patients sans réactivation du VZV La paralysie de Bell Nous avons également déterminé les causes de l’APFP chez les patients séronégatifs pour le HSV

Patients et méthodes

Patients L’étude a inclus des patients qui, de septembre à mars, ont visité les cliniques Hokkaido University Hospital, Sapporo, l’hôpital Tenshi, Sapporo, et l’hôpital général Shinnittetsu Muroran, Muroran, Japon quelques jours après le début des patients APFP âgés de & lt; Les échantillons de sérum des patients atteints du syndrome de Ramsay Hunt ont été analysés une fois lors de la visite initiale Des échantillons de salive ont été prélevés sur des patients Ces échantillons ont été prélevés – À chaque visite, on a diagnostiqué le syndrome de Ramsay Hunt si, en plus de l’APFP, des lésions typiques du zona autour de l’oreille ou de l’épithélium buccal étaient diagnostiquées si l’ADN du VZV était détecté dans les échantillons salivaires par analyse PCR ou lorsque les tests sérologiques indiquaient une infection récente par le VZV. L’ADN de l’ADN a été prélevé à partir d’échantillons de salive à l’aide d’un kit d’extraction d’ADN SepaGene, Sanko Junyaku Co, l’ADN du VZV de Tokyo et l’ADN HSV de HSV dans les échantillons de salive ont été détectés en utilisant un échantillon imbriqué. Méthode PCR, comme décrit par ailleurs Pour la détection de HSV-ADN de type HSV, des paires d’amorces spécifiques de la région promotrice Le gène glycoprotéine D du HSV- a été utilisé Les tests ELISA communs au VZV et au HSV ont été mesurés en utilisant des kits ELISA Enzygnost Anti-VZV / IgG et IgM et Enzygnost Anti-HSV / IgG et IgM, respectivement; Behring-Werke, Marburg, Allemagne et un processeur ELISA automatique Processor III, Behring-Werke Comme recommandé par le fabricant, soit des changements significatifs dans les niveaux d’anticorps IgG ou la présence d’anticorps IgM ont été considérés comme indiquant des infections récentes avec VZV et ELISA spécifique au type HSVHSV Pour la détermination du type HSV, l’antigène spécifique de la glycoprotéine G de HSV fourni gracieusement par SmithKline Beecham, London et l’antigène spécifique de la glycoprotéine G du HSV ont été utilisés Plaques de microtitration Plaques Nunc Immuno; Nunc, Roshilde, Danemark ont ​​été incubés avec des échantillons de sérum à une dilution de: Pour la détermination des anticorps IgG, des anticorps de lapin conjugués à la phosphatase alcaline à l’anticorps IgG humain Dako A / S, Glostrup, Danemark ont ​​été utilisés dans chaque plaque. les échantillons de sérum témoin ont été inclus; les échantillons de sérum étaient considérés comme positifs si leur absorbance était supérieure à l’absorbance moyenne du sérum des sujets témoins négatifs. Western blot spécifique au type de HSV Des monocouches confluentes de cellules Hep ont été infectées par la souche HSV: ou HSV – souche B les deux souches isolées à Göteborg, Suède à une multiplicité d’infection de pfu / cellule Les antigènes HSV et HSV- ont été préparés comme décrit ailleurs Les antigènes ont été séparés par PAGE en utilisant un% de gel de polyacrylamide% de gels Tris-acétate NuPAGE; NOVEX, San Diego, CA et ont été transférés sur des membranes de polyvinylidène-difluorure Immobilon-P; Millipore, Bedford, MA Les membranes ont été séchées et coupées en bandes -mm largeur La procédure immunoblot a été réalisée comme décrit ailleurs Analyse d’autres agents infectieux Pour les patients HSV-séronégatifs pour lesquels l’analyse PCR et les tests sérologiques n’indiquaient pas la réactivation du VZV, les niveaux d’anticorps dirigés contre l’EBV du virus d’Epstein-Barr et l’anticorps dirigé contre le CMV du cytomégalovirus ont été analysés par Enzygnost Anti-EBV / IgG et IgM et Enzygnost Anti-CMV / IgG et IgM, respectivement; Behring-Werke Western blot pour les anticorps contre Borrelia a été réalisée en utilisant la souche Borrelia garinii HP et Borrelia afzelii souche P / Gau comme antigènes

Résultats

Diagnostics cliniques et virologiques de l’APFP Parmi les patients atteints d’APFP, il y avait des lésions typiques du zona autour de l’oreille ou dans l’épithélium buccal en plus de l’APFP lors de leur première visite; ces patients avaient un diagnostic de syndrome de Ramsay Hunt; La maladie de Bell a été diagnostiquée cliniquement chez les autres patients lors de la première visite Les lésions zoster sont apparues après la première visite chez les patients chez qui la paralysie de Bell a été diagnostiquée. Le syndrome de Ramsay Hunt a été diagnostiqué chez un total de patients. dont les échantillons de salvia ont été testés par analyse PCR et chez% des patients dont les échantillons sériques appariés ont été testés par des tests sérologiques. La réactivation VZV n’a pas été détectée par des tests virologiques chez des patients présentant des lésions cliniquement apparentes du zona

Figure Vue largeDownload slideFiche des diagnostics cliniques et virologiques pour les patients atteints de paralysie faciale périphérique aiguë APFP Nos patients avec diagnostics indiqués sont indiqués entre parenthèses RHS, syndrome de Ramsay Hunt; VZV, virus varicelle-zona; ZSH, zoster sine herpete; RHSa, les lésions du zona sont apparues après la première visite cliniqueFigure Vue largeTélécharger la diapositive Diagramme des diagnostics cliniques et virologiques pour les patients atteints de paralysie faciale périphérique aiguë APFP Nos patients avec diagnostics indiqués sont indiqués entre parenthèses RHS, syndrome de Ramsay Hunt; VZV, virus varicelle-zona; ZSH, zoster sine herpete; RHSa, des lésions de zona sont apparues après la première visite à la clinique

Tableau View largeTélécharger Diapositive Diagnostic virologique du virus de la varicelle-zona Réactivation du VZV chez les patients atteints de paralysie faciale périphérique aiguëTable View largeTélécharger Diapositive Diagnostic virologique du virus de la varicelle-zona Réactivation VZV chez les patients présentant une paralysie faciale périphérique aiguëPour les autres patients présentant un diagnostic clinique de paralysie de Bell Onze des patients présentaient une augmentation significative des taux d’anticorps IgG contre le VZV ou la présence d’anticorps IgM, tandis que l’ADN du VZV était détecté dans des échantillons de salive prélevés sur des échantillons de salive. les patients restants présentant une absence de réponse détectable au VZV. En outre, les tests sérologiques ont montré une réactivation du VZV chez les patients, bien que l’ADN VZV n’ait pas été détecté. Ces patients ne présentaient pas de lésions zona et ZSH a été diagnostiquée. un diagnostic clinique des échantillons de palsySaliva de Bell étaient coll dans les jours qui ont suivi l’apparition de la paralysie chez les patients atteints de la paralysie de Bell, pas de réactivation du VZV; L’HSV-ADN a été détecté dans des échantillons provenant de patients. Trois des patients n’avaient pas d’anticorps contre le HSV. Par conséquent, l’incidence de la réactivation HSV chez les patients HSV séropositifs atteints de paralysie de Bell pendant la phase aiguë de la maladie était de% / avait un herpès labial typique au début de la paralysie Un autre patient présentait une augmentation significative des taux d’anticorps IgG anti-HSV Aucun ADN HSV n’a été détecté Au total,% des patients APFP avaient une réactivation du VZV ou du HSV au moment de l’apparition de la paralysie.

Tableau View largeDownload slidePrévalence des anticorps contre le virus de l’herpès simplex HSV chez les patients atteints de paralysie faciale périphérique aiguëTable View largeTélécharger slidePrévalence des anticorps contre le virus de l’herpès simplex HSV chez les patients atteints de paralysie faciale périphérique aiguëPrévalence des anticorps anti-VHS chez les patients avec ELISA type commun La prévalence des anticorps anti-HSV a été comparée entre les patients diagnostiqués avec la réactivation du VZV, le syndrome de Ramsay Hunt ou ZSH et ceux diagnostiqués avec la paralysie de Bell La différence de prévalence des anticorps anti-VHS entre les patients atteints de paralysie de Bell et ceux La réactivation du VZV était statistiquement significative% vs%, respectivement; P & lt; , Les anticorps spécifiques de type testHV de Fisher et la réactivation du VZV chez les patients avec ELISA type commun APFP ont montré que% de patients étaient HSV-séronégatifs Le manque d’anticorps anti-HSV a été confirmé par Western blotting Ramsay Hunt syndrome a été diagnostiqué chez HSV -Seronegative patients, et la preuve virologique de la réactivation VZV indiqué ZSH chez les patients séronégatifs HSV Ainsi, la réactivation VZV a été détectée en% des patients séronégatifs HSV qui ont eu APFP

Tableau View largeTélécharger slideHerpes simplex virus HSV anticorps spécifiques de type et le virus de la varicelle-zona VZV réactivation chez les patients atteints de paralysie faciale périphérique aiguëTable View largeTélécharger diapositiveHerpes simplex virus HSV anticorps spécifiques de type et virus varicelle-zona VZV réactivation chez les patients atteints de paralysie faciale périphérique aiguë type HSV Un test ELISA spécifique a été réalisé chez les patients séropositifs pour HSV avec utilisation d’antigènes spécifiques de la glycoprotéine HSV et de la glycoprotéine G spécifique au HSV Au total, des échantillons sériques ont réagi avec l’antigène spécifique de la glycoprotéine G, alors que les échantillons sériques étaient positifs antigène spécifique de la glycoprotéine G HSV Le Western blot spécifique au type HSV a été utilisé pour analyser des échantillons sériques négatifs pour l’antigène spécifique de la glycoprotéine G du HSV ou positifs pour l’antigène spécifique de la glycoprotéine G du HSV car, dans notre étude témoin, le Western blot des échantillons de sérum ayant réagi avec l’antigène spécifique de la glycoprotéine G du VHS, mais pas avec la glycoprotéine G spécifique du VHS; Par le Western blot,% des patients avaient seulement un anticorps contre le HSV-, et les patients% présentaient des anticorps contre le HSV et le HSV- les autres patients n’avaient que des anticorps contre le HSV- la réactivation du VZV du tableau a été détectée. en% des patients ayant seulement un anticorps anti-VHS et chez un% des patients ayant un anticorps anti-VHS seulement. Ainsi, la réactivation du VZV a été détectée chez les patients ayant un anticorps anti-VHS ou VHS. HSV- et HSV- avaient une réactivation du VZV La différence, cependant, n’était pas statistiquement significative. P =, Preuve exacte de Fisher Prévalence liée aux anticorps de la réactivation du HSV et du VZV La prévalence des anticorps anti-HSV étant en baisse chez les plus jeunes au Japon, ainsi que dans les populations d’autres pays développés , nous avons comparé la prévalence des anticorps au VHS avec l’incidence de la réactivation du VZV, car ils se rapportent à l’âge du patient. HSV était plus faible chez les patients avec APFP qui étaient âgés & lt; années% -% que chez les patients âgés de & gt; À l’inverse, l’incidence de l’APFP causée par la réactivation du VZV était plus élevée de% -% chez les patients âgés de & lt; ans que chez les patients plus âgés Il est intéressant de noter que, chez les patients âgés de moins d’un an, l’incidence de la réactivation du VZV était plus faible, et la prévalence des anticorps anti-HSV était plus élevée%

Figure View largeTéléchargement de la prévalence des anticorps dirigés contre le virus de l’herpès simplex HSV et incidence de la réactivation du virus de la varicelle et du zona VZV Barre blanche, patients séropositifs pour le HSV; barre noire, patients avec réactivation VZV Nos patients dans les groupes d’âge étaient les suivants: – années, patients; – années, ; – années, ; – années, ; – années, ; – années, ; – années, ; et ≥ ans, Figure vue large Télécharger la prévalence des anticorps dirigés contre le virus de l’herpès simplex HSV et l’incidence de la réactivation du virus de la varicelle et du zona VZV Barre blanche, patients séropositifs pour le HSV; barre noire, patients avec réactivation VZV Nos patients dans les groupes d’âge étaient les suivants: – années, patients; – années, ; – années, ; – années, ; – années, ; – années, ; – années, ; et ≥ ans, Analyse d’autres agents infectieux chez les patients séronégatifs au VHS Chez les patients séronégatifs au VHS avec APFP, nous n’avons pas pu détecter la réactivation du VZV par des tests sérologiques ou par PCR Pour étudier d’autres causes infectieuses de l’APFP chez ces VHS séronégatifs patients, nous avons analysé les échantillons sériques des patients pour EBV, CMV et Borrelia Tous les patients manquaient d’anticorps IgM contre EBV et CMV, et aucune séroconversion en EBV ou CMV n’a été observée Deux patients avaient des anticorps IgM et IgG contre B garinii et B afzelii; Ces résultats ont été confirmés par Western Blot. Les résultats correspondent aux critères du diagnostic sérologique de la maladie de Lyme par les Centers for Disease Control Ces patients se plaignaient de céphalées mais ne présentaient pas les lésions cutanées typiques erythema migrans. anticorps contre B garinii

Table View largeTélécharger slideAntibodies to Borrelia chez les patients séronégatifs au virus de l’herpès simplex avec paralysie faciale périphérique aiguë sans réactivation du virus varicelle-zonaTable View largeTélécharger slideAntibodies to Borrelia chez les patients séronégatifs au virus de l’herpès simplex atteints de paralysie faciale périphérique aiguë qui ne présentaient pas de varicelle réactivation du virus du zona

Discussion

d’APFP chez les patients HSV-séronégatifs Bien que d’autres études prospectives avec de plus grandes séries de patients avec APFP sont nécessaires pour confirmer nos résultats, cette étude suggère fortement que la réactivation VZV provoque APFP chez la plupart des patients qui n’ont pas d’anticorps contre HSV. que l ‘incidence de la réactivation du VZV chez les patients avec APFP est plus élevée chez les patients âgés de – ans; et il a été démontré que la prévalence des anticorps anti-HSV est plus faible chez les plus jeunes au Japon que chez les personnes âgées Ces résultats doivent être pris en compte lors du diagnostic et du traitement des jeunes patients APFP En raison de l’incidence du zona chez les enfants est plus élevé pour ceux qui ont une infection primaire au VZV au cours de la première année , une étude plus approfondie du moment de la première exposition au VZV et des anticorps contre le VHS facilitera l’identification des facteurs de risque de la réactivation du VZV chez les jeunes Le taux de paralysie faciale chez les patients présentant une réactivation du VZV est inférieur à celui des patients atteints de paralysie de Bell Nous avons précédemment rapporté que l’analyse PCR est une méthode utile pour le diagnostic précoce de ZSH chez les patients détectés en% des échantillons de salive, même ceux obtenus dans les jours suivant l’apparition des données sur la paralysie non montrées chez les patients séronégatifs au VHS qui ont eu une réaction au VZV Nous avons été diagnostiqués cliniquement avec la paralysie de Bell à la première visite. Nous avons été incapables de détecter l’ADN du VZV par analyse PCR des échantillons de salive obtenus lors de la première visite des patients. Nos données suggèrent que l’absence d’anticorps contre Le HSV est un marqueur fiable pour le diagnostic du syndrome de ZSH et de Ramsay Hunt chez les patients qui ont reçu un diagnostic clinique de paralysie de Bell lors de la première visite; par conséquent, un immunodosage rapide pour la détection des anticorps anti-HSV pourrait être utile pour prédire la réactivation du VZV avant l’apparition des lésions zona ou avant les tests sérologiques avec des sérums appariés indiquent une réactivation du VZV chez les patients pour lesquels l’analyse PCR est négative. pour les patients jeunes, moins susceptibles d’avoir des anticorps anti-VHS. Cette étude a également confirmé que la prévalence des anticorps anti-HSV chez les patients atteints de paralysie de Bell est significativement plus élevée que chez les patients ayant une réactivation du VZV ananas. pour les patients avec APFP Notre étude a montré que la prévalence des anticorps anti-HSV est très faible dans les deux groupes de patients avec réactivation du VZV et paralysie de Bell. Ces résultats sont en accord avec une analyse sérologique récente au Japon Nous avons trouvé seulement des patients atteints de paralysie de Bell qui avait seulement l’anticorps contre le VHS – Parce que le VHS provoque une paralysie faciale , nous enquêtons l’excrétion de HSV dans la salive chez les patients qui avaient des anticorps anti-VHS; En revanche, nous avons trouvé des patients atteints de paralysie de Bell qui ont éliminé le VHS dans la salive quelques jours après l’apparition de la paralysie. D’autres études sont nécessaires pour analyser le mécanisme par lequel la réactivation du VHS cause l’APFP. que la réactivation HSV est impliquée dans la pathogenèse de la paralysie de Bell chez les patients HSV-séronégatifs, nous n’avons pas pu détecter la réactivation du VZV. L’analyse PCR et les tests sérologiques ont été effectués en double, et aucune dégradation de l’ADN n’a été détectée. Comme la cause de l’APFP chez les patients HSV-séronégatifs qui n’ont pas de réactivation du VZV peut être diverse, nous avons cherché à déterminer d’autres causes infectieuses de l’APFP chez les patients. Il est intéressant que les patients aient eu des IgM. et IgG contre Borrelia, ce qui suggère une association entre l’APFP et la maladie de Lyme chez certains patients atteints de borréliose de Lyme, l’APFP a été décrite comme la Seule manifestation de la maladie Parce que la préfecture de Hokkaido, où vivent tous nos patients, est l’une des régions du Japon où la maladie de Lyme est fortement endémique , nous prévoyons d’analyser plus de patients atteints de paralysie de Borrelia. Nous pouvons considérer d’autres causes de l’APFP Une analyse plus approfondie de ces cas pourrait nous aider à élucider l’étiologie de la paralysie de Bell. En conclusion, nos résultats fournissent des preuves solides que le VZV est l’un des principaux agents étiologiques de la paralysie de Bell cliniquement diagnostiquée. que l’incidence de la réactivation du VZV chez les patients qui n’ont pas d’anticorps contre le HSV est élevée. En revanche, nos résultats démontrent que la prévalence des anticorps contre le VHS chez les patients atteints de paralysie de Bell est significativement plus élevée que chez les patients ayant une réactivation du VZV, ce qui confirme l’hypothèse selon laquelle la réactivation du VHS est impliqué dans la pathogenèse de la paralysie de Bell

Remerciements

Nous remercions le Dr Eiji Chida et l’Hôpital Dr Yasushi Mesuda Tenshi et l’Hôpital Général Dr Fumiyuki Suzuki Shinnittetsu Muroran pour leur aide dans la collecte des échantillons cliniques. Nous remercions également le Professeur Yukio Inuyama et le Dr Peter Horal pour leur généreux soutien. Itoh, Izumi Satoh, Erina Katoh, Ann-Sofie Andersson et Zohreh Sadegzadeh pour leur excellente assistance technique